Reazione a catena della polimerasi
"Reazione a catena della polimerasi": un metodo per la moltiplicazione di una sezione definita di DNA.
L'americano Kary Mullis ha sviluppato la PCR a metà degli anni '80 e ha ricevuto il Premio Nobel per la Chimica nel 1993. È alla base della ricerca biologica molecolare, ma anche della diagnosi di agenti patogeni, compreso il monitoraggio delle terapie antivirali e delle analisi del DNA in medicina legale per l'accertamento di tracce e la determinazione della paternità.Per l'amplificazione del DNA, il doppio filamento viene separato nei due filamenti singoli per effetto del calore e, nella successiva fase di raffreddamento, le molecole di avvio si legano ai singoli filamenti. Esse segnano l'inizio della replicazione. Una DNA polimerasi batterica stabile al calore completa ora i singoli filamenti di DNA in doppie eliche quando viene riscaldata a 72 °C con l'aiuto di frammenti nucleotidici aggiunti. La ripetizione di questa sequenza di reazione - i cicli di PCR - è controllata dalla curva di temperatura. Ciò consente di moltiplicare esponenzialmente i segmenti di DNA in poche ore.
Tuttavia, ciò richiede anche un lavoro estremamente pulito, poiché qualsiasi contaminazione con tracce di DNA indesiderato viene amplificata!